Résumé
Cet article propose un guide complet pour le traitement et le montage des phlébotomes, étapes cruciales pour l’identification des espèces et la détection ou l’isolement des pathogènes. Il aborde diverses techniques adaptées au terrain comme au laboratoire. Le guide comprend des instructions détaillées sur la collecte, la manipulation, la protection et l’euthanasie des phlébotomes (avec recommandation de la congélation à sec ou du CO 2 plutôt que de l’usage de produits chimiques), ainsi que sur les stratégies de conservation telles que la réfrigération et la conservation dans l’éthanol. La préparation des structures anatomiques spécifiques (organes génitaux, tête et ailes) pour l’observation microscopique est privilégiée dans la description des techniques de dissection. Le document présente également le traitement détaillé des échantillons, notamment la clarification à l’aide de solutions telles que la potasse puis le liquide de Marc-André. Le processus de montage compare différents milieux, en soulignant leurs propriétés optiques et leur potentiel de conservation. Le liquide de Hoyer (également appelé gomme au chloral) est recommandé pour l’observation rapide, en particulier pour les spermathèques, en raison de sa limpidité, bien qu’il ne convienne pas à la conservation à long terme. D’autres milieux de culture sont abordés, notamment l’alcool polyvinylique, l’Euparal ® (pour une tolérance limitée à l’eau) et le baume du Canada (un milieu soluble dans les hydrocarbures), ces deux derniers permettant une conservation à long terme. Les approches innovantes de biologie moléculaire, telles que le séquençage de l’ADN et la spectrométrie de masse MALDI-ToF, qui exigent une attention particulière lors du traitement des échantillons, sont également présentées. De plus, de courtes vidéos illustrant diverses techniques de montage et des traductions en de nombreuses langues sont disponibles, permettant ainsi de répondre aux besoins et attentes variés de la communauté scientifique internationale.