Résumé
Les symptômes cliniques communs aux infections arbovirales et leur co-circulation en zones endémiques rendent complexe leur diagnostic. Combiner les tests moléculaires et immunologiques sur une même plateforme permettrait d’améliorer la surveillance épidémiologique et la prise en charge des patients. Dans ce contexte, nous avons évalué une nouvelle approche analytique utilisant l’agglutination de nanoparticules superparamagnétiques (NPMag). Les génomes des virus Dengue (DENV) et ZIKA (ZIKV) sont amplifiés par RT-PCR pan-flavivirus puis capturés par des sondes polythiols greffées sur des NPMag. Ces sondes ont été validées par ELOSA (test moléculaire en format microplaque). Le test immunologique utilise des NPMag fonctionalisées par des protéines virales recombinantes NS1 pour détecter les anticorps anti-DENV ou anti-ZIKV. Les agrégats sont formés durant plusieurs cycles d’aimantation/relaxation puis détectés par une mesure d’absorbance. Une sensibilité analytique de 10–102 TCID50/mL est obtenue sur les gammes de référence (CNR Arboviroses). Sur 16 plasmas humains ZIKV positifs en RT-PCR (Ct<36 ; Altona) 14 sont détectés par notre approche. Aucune réaction croisée ni de résultat faux positif n’ont été observés. Dix plasmas commerciaux DENV ou ZIKV séropositifs sont tous détectés par cette technique. Le temps d’analyse est inférieur à 15min. L’agglutination de particules superparamagnetiques autorise l’analyse de tests moléculaires et sérologiques et offre donc une nouvelle opportunité pour le développement de tests sanguins rapides et combinés.