Résumé
Les kinases dépendantes des cyclines (Cdk) sont actives si elles forment des complexes avec les cyclines. Les Cdk4/Cycl D1 et Cdk2/Cyc E interviennent dans la régulation du cycle cellulaire : sortie de quiescence et progression à travers la phase G1 pour Cdk4/Cyc D1, transition G1/S pour Cdk2-Cyc E. Notre objectif a été d’évaluer, dans l’épiderme humain normal et psoriasique, l’expression et l’activité fonctionnelle des Cdk4 et Cdk2 grâce à des biosenseurs cutanés spécifiques.
Notre étude a porté sur 20 malades atteints de psoriasis modérés à sévères. Chez chaque patient, des biopsies ont été pratiquées en peau lésée et en peau saine périlésionnelle. L’expression des molécules d’intérêt a été étudiée par immunohistochimie, microscopie confocale et immunoblots épidermiques. La transcription des gènes a été évaluée par qPCR et l’activité fonctionnelle des Cdk4 et Cdk2 a été quantifiée à l’aide de biosenseurs fluorescents spécifiques (WWH3c pour Cdk2, WwshortRbc pour Cdk4) en présence ou des non-inhibiteurs de Cdk2 (roscovitine) et de Cdk4 (abemaciclib).
Il existait une induction de l’expression cytoplasmique des Cdk2 et Cdk4 dans l’épiderme psoriasique avec conservation de celle-ci dans les cellules les plus différenciées. Les immunoblots épidermiques permettaient de confirmer l’induction de Cdk4 et la forte augmentation de Cdk2. Les résultats de l’analyse en qPCR ont montré une discrète inhibition des gènes codant pour Cdk4 et une nette inhibition de la transcription de Cdk2. L’activité fonctionnelle de Cdk2 était augmentée dans l’épiderme lésionnel contrairement à celle de la Cdk4 qui était effondrée. Cette inhibition de Cdk4 en peau lésée était associée à une augmentation de l’expression cytoplasmique et nucléaire de la cyc D1 et de la protéine p21 en peau lésée. Il existait, en revanche, une diminution de l’expression membranaire de la protéine p27 dans l’épiderme psoriasique. On retrouvait une forte augmentation de l’expression de la protéine p16 (inhibiteur de Cdk4) dans l’épiderme lésionnel.
Il existe in vivo dans l’épiderme psoriasique un effondrement de l’activité fonctionnelle des complexes Cdk4/Cyc D1. Cette inhibition ne résulterait pas d’une diminution de l’expression des protéines Cdk4 et cyc D1 qui sont au contraire fortement exprimées en peau lésée. Elle pourrait être secondaire à une inhibition de leur dégradation par le protéasome. L’effondrement de l’activité des Cdk4 pourrait être due à une séquestration de ces protéines ou à l’augmentation de leurs inhibiteurs physiologiques p16 et p21. L’augmentation de l’activité des complexes Cdk2/cyc E pourrait résulter de l’augmentation d’expression de la Cdk2. Elle pourrait être également due à une levée d’inhibition par p27 dont l’expression est diminuée dans l’épiderme psoriasique.
Ces résultats permettent de mieux comprendre les mécanismes de l’homéostasie épidermique au cours du psoriasis.