Résumé
La sclérodermie systémique (ScS) est une maladie systémique rare et potentiellement létale, pour laquelle les ressources thérapeutiques sont très limitées. Seuls des traitements symptomatiques sont disponibles à ce jour. Dans une perspective de traitement curatif, nous avons montré l’efficacité thérapeutique d’une injection de cellules souches mésenchymateuses (CSM) dans un modèle murin de ScS induite par l’acide hypochloreux (HOCl) [1]. Bien que le mécanisme d’action de ces CSM soit encore mal connu, elles agissent majoritairement au travers de la sécrétion de facteurs solubles qui peuvent être libérés au sein de vésicules extracellulaires (EV), notamment les petites vésicules (sEV) ou les grandes vésicules qui incluent les microparticules (lEV) [2]. Parmi ces facteurs, les microARNs semblent jouer un rôle important mais sont encore peu étudiés. Notre hypothèse est que miR-29a est exprimé par les CSM et responsable, au moins en partie, de leur rôle anti-fibrotique [3].
Les objectifs de notre travail sont de déterminer dans un modèle murin de ScS :
– L’effet thérapeutique de différents sous-types d’EV issues de CSM,
– Le rôle de miR-29a dans l’effet thérapeutique des CSM.
Le modèle de ScS est obtenu par injections quotidiennes intradermiques d’HOCl à des souris femelles BALB/c âgées de 6 semaines. Au 21e jour, chaque groupe reçoit un traitement par injection intraveineuse : sérum physiologique, CSM (2,5×10e5) ; sEV ou lEV (4×10e7) isolées de CSM non transfectées ; CSM (2,5×10e5) ou EV (4×10e7) isolées de CSM transfectées par un inhibiteur de miR-29a ou miR-contrôle. Nous suivons l’évolution de l’épaisseur cutanée toutes les semaines et évaluons l’effet des différents traitements à l’échelle histologique, protéique et moléculaire (expression tissulaire des collagènes 1 et 3, αsma, TGFβ, MMP 1 et 9, TIMP1, IL1β, IL6, TNFα), dans les prélèvements pulmonaires et cutanés au 42e jour.
Dans un premier temps, nous montrons que les sEV et les lEV diminuent le pli cutané, les paramètres de fibrose et de l’inflammation, et améliorent le remodelage de la MEC au niveau cutané ou pulmonaire, comparé au groupe HOCl. Ces données moléculaires sont confirmées au niveau histologique. Dans un second temps, en utilisant un inhibiteur spécifique, nous montrons que la diminution d’expression de miR-29a au sein des CSM reverse en partie leur effet thérapeutique. De manière intéressante, cette diminution d’expression est également observée dans les EV qui sont moins efficaces que les EV issues de CSM contrôles, à diminuer les paramètres associés à la fibrose.
L’injection d’EV isolées de CSM et les CSM montre une efficacité thérapeutique semblable sur les données cliniques, histologiques et moléculaires. Cet effet thérapeutique est médié, au moins en partie, par miR-29a véhiculé au sein de leur EV.