Résumé
Les cancers du sein triple-négatifs (TNBC) (RE-, RP-, HER2-) représentent 15 à 20 % des cas de cancer du sein. La résistance aux traitements systémiques est très fréquente dans le TNBC, ce qui nécessite de nouveaux traitements. L'aspartyl protéase cathepsine D (cath-D), un marqueur indépendant de mauvais pronostic dans le cancer du sein, est surexprimée et hypersécrétée dans le microenvironnement tumoral des TNBC. Récemment, notre équipe a montré que la cath-D est une cible extracellulaire des TNBC pour une thérapie ciblée à base d'anticorps (Ashraf, Mansouri et al., JITC, 2019 ; brevet PCT WO2016/188911). Un premier anticorps humain anti-cath-D, généré par phage display, a montré des effets antitumoraux significatifs dans plusieurs modèles de TNBC (lignée MDA-MB-231 et Patient-Derived Xenografts (PDX)) chez la souris athymique ainsi qu’une activité immunomodulatrice avec notamment une activation des cellules tueuses naturelles (NK) (brevet PCT WO2020/127411).L'objectif de ma thèse a été l’optimisation du format de l’anticorps humain anti-cath-D dans sa partie Fc (Fragment crystallisable) afin d’améliorer son efficacité thérapeutique en mono- et combothérapie pour son transfert en clinique.Dans un premier temps, nous avons validé que la cath-D est localisée à la surface membranaire des cellules cancéreuses dans des lignées et des biopsies de TNBC, suggérant qu’elle serait un antigène éligible pour déclencher le mécanisme d’ADCC (Antibody-dependent cellular cytotoxicity) par la partie Fc de l’anticorps anti-cath-D. Nous avons ensuite réalisé quatre mutations sur la partie Fc de l’anticorps afin de potentialiser les mécanismes de cytotoxicité dépendant du Fc (ADCC, CDC (Complement-dependent cytotoxicity) et ADCP (Antibody-dependent cellular phagocytosis)). Ces mutations ne modifient pas l'affinité de l'anticorps F1Fc+ pour sa cible cath-D mais augmentent l'affinité pour le FcγRIIIA, récepteur majoritairement impliqué dans l'ADCC. Nous avons aussi montré que l’anticorps F1Fc+ induit la dégranulation et l'activité cytotoxique des cellules NK conduisant à la lyse des cellules TNBC par le mécanisme d’ADCC.De plus, l’anticorps anti-cath-D F1Fc+ inhibe la croissance tumorale des xénogreffes MDA-MB-231 de façon plus importante que l'anticorps F1 non muté en Fc chez la souris athymique. Ces tumeurs ont été analysées par immunophénotypage afin d’étudier les mécanismes dépendants des cellules NK in vivo. En outre, cet anticorps inhibe la croissance tumorale et augmente la survie des souris athymiques dans d’autres modèles de TNBC (xénogreffes SUM-159 et deux PDX). Enfin, des stratégies de traitement combiné de l’anticorps anti-cath-D F1Fc+ avec notamment le paclitaxel ont été mises en place et ont montré des effets additifs.Nous avons donc validé l'intérêt thérapeutique d'un anticorps humain anti-cath-D à Fc optimisé pour cibler la protéase extracellulaire cath-D, dans les TNBC. Nous proposons que le ciblage de la cath-D par des anticorps humains représente une stratégie prometteuse de thérapie ciblée des TNBC.