Résumé
Chez Arabidopsis thaliana, les canaux potassiques de la famille Shaker sont les mieux caractérisés aux niveaux physiologique et fonctionnel, mais les mécanismes moléculaires de leur régulation post?traductionnelle restent méconnus. L'étude en système hétérologue des caractéristiques fonctionnelles du canal AKT2 et la découverte d'une phosphatase, AtPP2CA, susceptible de réguler son activité, nous ont conduit à choisir AKT2 comme canal modèle pour l'étude de la régulation des canaux Shaker par des mécanismes de phosphorylations réversibles. Mes travaux rapportent l'identification d'un complexe protéique composé d'un senseur de calcium (CBL4, Calcineurin?B Like 4) et d'une protéine kinase (CIPK6, CBL?Interacting Protein Kinase 6) régulant l'activité d'AKT2. Des expériences de BiFC démontrent ainsi qu'in planta ces trois protéines interagissent et dans l'ovocyte, la co?expression d'AKT2 avec CIPK6 et CBL4 induit une stimulation d'AKT2 dépendante du calcium sans modification qualitative des propriétés fonctionnelles de ce canal. D'une manière intéressante, nos résultats diffèrent de ceux obtenus concernant la régulation d'AKT1 par CIPK23 et CBL1. En effet, la régulation d'AKT2 ne requiert pas l'activité kinase de CIPK6 et deux mécanismes distincts semblent impliqués : (1) Dans les cellules de tabac, CBL4 induit une relocalisation du complexe AKT2?CIPK6 vers la membrane plasmique et (2) dans l'ovocyte, CIPK6?CBL4 stabilise AKT2 dans un état hyperactif. Nous avons donc identifié un nouveau complexe CIPK?CBL régulant AKT2 par un mécanisme dépendant du calcium mais indépendant de l'activité kinase de CIPK6.