Résumé
La maladie d'Alzheimer est aujourd'hui la principale cause de démence sénile. Cette pathologie se caractérise par l'agrégation d'enchevêtrements neurofibrillaires dans les cellules et par l'accumulation de plaques, dites amyloïdes, dans le cerveau. Une protéine phosphorylée, la protéine Tau, ainsi que deux peptides présentant des séquences chevauchantes de 40 ou 42 résidus, appelés respectivement peptides β-amyloïdes 1-40 (Aβ 1-40) et 1-42 (Aβ 1-42), ont été associés à ces phénomènes. Dans ce contexte, nous avons cherché à mettre en oeuvre une méthode innovante afin de mettre en évidence la protéine Tau hyperphosphorylée et la déplétion du peptide Aβ 1-42 circulant par rapport au peptide Aβ 1-40 par spectrométrie de masse. Pour cela, la spectrométrie de masse par désorption/ionisation laser assistée par surface (SALDI-MS), une approche dérivée du MALDI-MS (désorption/ionisation laser assistée par matrice) a été étudiée. Les nanomatériaux couramment utilisés en SALDI-MS comme surfaces inertes sont utilisés afin de promouvoir les phénomènes de désorption/ionisation (D/I) et permettent le dépôt direct et simple des échantillons tout en fournissant des spectres de masse avec des ions uniquement liés au composé d'intérêt. Dans une première partie, le travail a porté sur l’optimisation de la détection de peptides modèles, de phosphopeptides et des peptides bêta-amyloïdes en SALDI-MS sur différentes surfaces structurées. Dans une deuxième partie, les meilleures surfaces ont été utilisées pour la détection de protéines sous leur forme intacte ou digérées. Ainsi deux méthodes SALDI-MS sensibles, spécifiques et efficaces ont pu être développées pour la détection des biomarqueurs de la maladie d’Alzheimer.