Résumé
Le sorgho, cinquième céréale la plus produite et consommée au monde, est une source riche en macro et micronutriments. Son grain contient 7 à 14 % de protéines, principalement des kafirines. Comparées aux autres protéines de stockage des céréales, les kafirines sont plus hydrophobes et fortement réticulées. En conséquence, elles présentent une plus grande résistance à l'hydrolyse par les protéases gastro-intestinales, et donc une digestibilité plus faible. Ce travail vise à développer un protocole fiable d'extraction des kafirines en vue d'une caractérisation biochimique et physicochimique.Nous avons étudié l'impact de divers facteurs, tels que le décorticage des grains, le type de solvant d'extraction, le temps d'extraction, le rapport échantillon/liquide et la température, sur le rendement de l'extraction de la kafirine. À l'aide d'une approche expérimentale à deux ou trois niveaux pour chaque facteur, nous avons utilisé la chromatographie d'exclusion stérique (SE-HPLC) avec détection UV pour analyser la composition des extraits protéiques. Nous avons déterminé le coefficient de conversion de la kafirine à 214 en utilisant la méthode Kjeldahl comme référence pour calculer le rendement d'extraction à partir des profils SEC. De plus, la composition de la kafirine a été évaluée par SDS-PAGE dans des conditions réduites et non réduites.Notre principale conclusion est que le décorticage initial des grains, un solvant composé à 60 % de tert-butanol et d'eau (v/v), une température de 60 °C, un rapport échantillon/solvant de 1:100 et deux cycles d'extraction de 10 minutes ont permis d'obtenir le rendement d'extraction maximal. Les paramètres d'extraction ont eu une influence significative sur l'extraction des kafirines, ce qui a permis de mieux comprendre le développement d'un protocole d'extraction robuste.Bien que diverses procédures d'extraction aient été décrites dans la littérature, elles reposent principalement sur l'utilisation d'alcali et de bisulfite de sodium, ce qui entraîne la dénaturation des kafirines. Par conséquent, le fractionnement et la caractérisation des kafirines à l'état natif restent limités. Cette étude contribue à la compréhension des propriétés de solubilité des kafirines et ouvre la voie à leur fractionnement futur à l'état natif. À partir de là, on peut envisager la détermination de la digestibilité intrinsèque des différentes sous-unités de kafirine, seules ou en combinaison.