Abstract
La membrane du globule gras laitier conditionne sa réactivité chimique et sa susceptibilité enzymatique. L’utilisation d’extraits membranaires bovins pour formuler des laits infantiles plus biomimétiques du lait humain a été proposée récemment1,2. Une comparaison du comportement physico-chimique des extraits membranaires humains et bovins et de leurs interactions avec la lipase gastrique humaine n’a jamais été réalisée pour déterminer si leur comportement interfacial est vraiment similaire. Cette comparaison est ici entreprise en utilisant des outils biophysiques complémentaires : tensiométrie, ellipsométrie, microscopie à angle de Brewster et de force atomique en présence ou en absence de lipase. Des extraits membranaires comprenant environ 70 % de lipides polaires (30 % triglycérides résiduels) ont été obtenus par extraction Folch puis acétonique à partir d’un pool de lait humain mature (n=5) ou de babeurre bovin. Des films de Langmuir et isothermes de compression (0 to 50 mN/m, 20°C) ont été réalisés à partir des deux extraits. Les films ont été transféré sur mica en présence ou en absence de lipase gastrique dans la sous-phase (pH 5, tampon d’acétate de sodium).L’extrait membranaire humain présentait une plus grande compressibilité avec une cohésion latérale moindre que l’extrait bovin. Des domaines condensés (LC) étaient visibles dans l’extrait humain dès 10 mN/m tandis que des domaines plus petits étaient observés dans l’extrait bovin. En compression, ces domaines LC devenaient plus nombreux mais restaient individualisés tandis qu’ils avaient tendance à fusionner dès 20 mN/m dans l’extrait bovin. En présence de lipase gastrique, la coexistence de phase liquide-liquide a impacté la distribution latérale de la lipase de façon similaire à ce qui avait été observé pour l’extrait bovin3: la lipase gastrique s’adsorbe dans la phase liquide expansée (LE) et à plusieurs niveaux de hauteurs indiquant différents mécanismes d’interaction avec la membrane. Les extraits membranaires humains et bovins partagent certaines propriétés physico-chimiques et présentent une réactivité interfaciale proche en conditions gastriques. L’approche biophysique proposée dans ce projet est intéressante pour caractériser les intéractions ‘lipase-lipides complexes’ et pourrait être appliquée à d’autres sources de lipides membranaires laitiers (e.g. equidae) ou végétaux.